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NK细胞培养的现状

2023-11-20

行业热点

NK细胞疗法在治疗恶性肿瘤的效果上如此出众,之所以没有被广泛应用起来,和NK细胞培养方法的局限性有脱不开的关系。NK细胞体外培养扩增困难,不论是什么来源的NK细胞,外周血、脐带血或者是干细胞来源,扩增都是目前一个比较大的瓶颈。

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当下常用的NK细胞体外扩增方法,主要有以下4种方式:

滋养层体系:一般通过K562细胞或经基因改造的K562细胞诱导扩增NK细胞,这种方法的优点在于细胞扩增活率高、速度快,容易获得高表型的CD56+ NK细胞,纯度高,杀伤性强。但是引入的滋养层细胞为肿瘤细胞,其潜在安全风险难以完全消除,这也会导致这种方式培养的NK细胞产品在药物申报方面获批的难度更大。此外,正常的细胞和肿瘤细胞共培养,将这样的细胞用于治疗回输体内,有很大的伦理风险,患者心理难以接受。

外周血或脐带血PBMC诱导:通过细胞因子诱导PBMC分化成NK细胞,这种方法使用的原本都是体内就有的因子,相当于模拟了体内环境,安全性更高。但是受限于血液样本初始NK比例的不稳定,培养的最终结果可能偏差较大,生产效率比较低,而且培养过程中需消耗大量细胞因子,成本较高。此外,市面上的纯因子培养工艺水平参差不齐,这就导致细胞的纯度可能不够,存在脱靶效应,杀伤效果偏弱。虽然纯因子的培养方法存在诸多问题,但是其安全性足够高,这就使得NK产品申报的获批难度有所降低。因此,纯因子培养法成为了当下主流的NK细胞培养方式。而且随着无血清产品的面世、NK细胞培养试剂的迭代升级,越来越多的企业选择纯因子培养法,这也会进一步促进上游企业研发性能更出色的产品反馈下游应用,从而形成一个良好的正向循环。

NK-92细胞系:NK92细胞是一种无限增殖的细胞系,具有高效的细胞毒性和稳定的免疫特性。NK92细胞更容易获取和扩增,容易培养,但是NK92的缺点也很明显,它对IL-2过于依赖,对人的身体负担很大,而且缺乏CD16的表达,杀伤能力较差,在使用时需要辐照处理、存在致瘤性,在体内存活时间极短。

iPSC或ESC诱导的NK定向分化:通过诱导iPSC或ESC定向分化成NK细胞,这种方法技术壁垒很高,而且iPSC的致瘤性尚未妥善解决,安全性和临床有效性仍需面临监管挑战。如果要应用在临床中,恐怕还有很长一段路要走。